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菌落总数检测板
菌落总数检测板

产品编号:32.8027
产品规格:5片/包 (4包一盒,20片)
接种数量:1ml/片
保存期限:12个月
产品用途:适合于各类食品及食品原料中菌落总数的测定。

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产品说明

 

1、原理及适用范围

    菌落总数是指样品经过处理,在一定条件下培养后所得1 mLg)检样或单位面积样品中所含菌落的总数,是最常用的微生物检测项目。菌落总数检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在检测板上呈红色,这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于各类食品及食品原料中菌落总数的测定。执行标准:《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》(GB 4789.2)。

 

2、操作方法

2.1  样品处理:取样品 25 mLg)放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质袋内,制成1:10的样品匀液,必要时用1 mol/LNaOH1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH6.67.21mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL,注入含有9 mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换一支吸管。

2.2  接种:一般食品选23个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将菌落总数检测板置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1 mL样品匀液滴加到检测板内,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,让样品匀液均匀吸附在滤纸上,静置10s左右,待样品匀液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。

2.3  培养:将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内。一般食品培养温度为36℃±1℃,培养1524 h;水产品培养温度为30±1℃,培养48 h

 

3、结果判读

     细菌在检测板上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(30300 CFU)的检测板进行计数,乘以稀释倍数后即为每毫升(或每克)样品中所含的细菌菌落总数。

 菌落总数检测板结果对照 

 

4、计数原则及报告方式

4.1  若只有一个稀释度检测板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个检测板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(或毫升)样品中菌落总数结果。

4.2  若有两个连续稀释度的检测板菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算

                                ················ (1

    式中:

    N——样品中菌落数;

    C——检测板上(含适宜范围菌落数的测试片)菌落数之和;

    n1——第一稀释度(低稀释倍数)检测板数;

    n2——第二稀释度(高稀释倍数)检测板数;

d——稀释因子(第一稀释度)

示例:

稀释度

1100(第一稀释度)

11000(第二稀释度)

菌落数

232244

3335

上述数据经“四舍五入”后,表示250002.5×104

 

4.3  若所有的稀释度菌落总数均大于300 CFU,则对稀释度最高的检测板进行计数,其他检测板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。

4.4  若所有的稀释度菌落总数均小于30 CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

4.5 若所有的稀释度(包括液体样品原液)均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。

4.6  若所有稀释度的平均菌落数均不在30 CFU300 CFU之间,其中一部分小于30 CFU或大于300CFU,则以最接近30 CFU300 CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

 

4.7 菌落总数的报告

4.7.1 菌落总数在100 CFU以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。

4.7.2 大于或等于100 CFU时,第三位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前两位数字,后面的0代替位数,也可用指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。

4.7.3 若测试片上一片红色无法计数时,则报告多不可计。

4.7.4 若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。

4.7.5 固体样品以CFU/g为单位报告,液体样品以CFU/mL为单位报告。

 

5、附加说明

5.1  菌落总数检测板检测结果与传统平板计数琼脂平板法符合率可达90%以上。

5.2  磷酸缓冲液稀释液的配制与灭菌:贮存液:称取34.0 g分析纯磷酸二氢钾(KH2PO4)溶于500 mL蒸馏水或纯净水中,用大约175 mL1 mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液调节PH7.2,用蒸馏水稀释至1000 mL后贮存于冰箱。稀释液:取贮存液1.25 mL,用蒸馏水稀释至1000 mL,分装于适宜容器中,121℃高压灭菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.3 生理盐水的配制与灭菌:取8.5 g分析纯氯化钠(NaCl)溶解到1000 mL蒸馏水或纯净水中,分装于适宜容器中,121℃高压灭菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.4 注意使用过的检测板上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。

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