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粪链球菌检测板
粪链球菌检测板

产品编号:32.8033
产品规格:5片/包 (4包一盒,20片)
接种数量:1ml/片
保存期限:12个月
产品用途:适合于生活饮用水、生产加工用水及食品中粪链球菌的测定。

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产品说明

 

1、原理及适用范围

粪链球菌普遍存在于水环境中,为条件致病菌,它来源于人和温血动物的粪便,可以在水中存活很长时间,引起人类疾病。是水体受到粪便污染的重要指标菌,更能客观的反映水质卫生状况。中华人民共和国城镇建设标准在对城市供水、饮用水水质监测中增加了水中粪链球菌的检测指标。粪链球菌检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在检测板上呈红色带黄晕斑点。本产品适合于生活饮用水、生产加工用水及食品中粪链球菌的测定。                 

执行标准:中华人民共和国国家标准《饮用天然矿泉水检验方法》(GB/T 8538);中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口商品中粪链球菌群检验SN/T 0475)。

 

2、操作方法

2.1水样品检测

2.1.1 水样过滤:将灭菌的过滤装置连接到抽滤瓶上,用灭菌镊子夹取直径47 mm50 mm,孔径为0.45μm的灭菌滤膜,放在滤器底部,旋紧盖子,将250 mL水样注入滤器中抽滤。

2.1.2  揭开检测板上层膜,在检测板纸片上加1 mL无菌水湿润后,迅速用无菌镊子将过滤水样的滤膜移放在检测板纸片上(滤膜截留细菌面向上),滤膜与纸片之间不要夹留着气泡,贴好上层膜

2.2食品样品检测

2.2.1  25 g25 mL样品放入装有225 mL生理盐水的均质袋中,以8000 r/min均质12 min,制成1:10样品均液,根据样品污染程度及检验需要,可进一步制成10倍递增的样品稀释液。

2.2.2 将粪链球菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1 mL样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置10 s左右,待样品稀释液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复

2.3 培养:将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36±1℃,培养1524 h

 

3、结果判读

在检测板(滤膜)上生长的红色带黄晕的斑点即为粪链球菌阳性,若纸片上的红色斑点无黄晕则为粪链球菌阴性。

粪链球菌检测板结果对照 

 

4、计数原则及报告方式

4.1  滤膜过滤水样:以滤过一张无菌滤膜后产生的菌落数计算,选择菌落数在20100CFU的检测板进行计数后即为250 mL水样品中所含的菌落总数。结果以CFU/250 mL为单位报告。

4.2 食品样品计数

4.2.1 以生长有30300CFU的检测板为计数适宜范围。

4.2.2 若只有一个稀释度检测板上的菌落数在计数合适范围30300CFU之间,则计算两个检测板菌落数的平均值,再除以相应的稀释倍数,作为每克(毫升)中菌落总数结果。

4.2.3 若有两个连续稀释度在适宜计数范围内时,按式(1)计算:

                        ∑C

               N= ————————     •••••••••••••••••••1

                   (n1+0.1n2d

   式中:

   N——样品中粪链球菌菌落数;

   ∑C——两个连续稀释度检测板(含适宜范围菌落数的检测板)粪链球菌菌落之和;

   n1——适宜范围菌落数的第一个稀释度(低)检测板个数

   n2——适宜范围菌落数的第二个稀释度(高)检测板个数

   d——第一稀释度的稀释倍数

 示例:

稀释度

1:10(第一个稀释度)

1:100(第二个稀释度)

菌落数

245247

3130

 

                   (245+247+31+30

               N= —————————— =2514

                  (2+0.1×2)×10-1

结果表述为2.5×103CFU/g(ml)

4.2.4 若所有稀释度检测板上均无菌落生长,则以小于1/dd—最低稀释倍数)计算。

4.2.5低数值的估算:如果实验样品原液(水及液体饮料)或初始稀释悬液(其他样品)的两个检测板上的菌落数均小于30CFU,计算两个检测板上的菌落数的平均数。计算式(2):

                    ∑C

                  NE = ——    •••••••••••••••••••2

                        nd

式中

NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值;

C——两个检测板上菌落数的和;

n——检测板的数量;

d——样品初始悬液或实际接种悬液的稀释倍数。

4.2.6大数值的估算:若所有稀释度的检测板上菌落数均大于300CFU,计数最接近300CFU检测板上的菌落并计算出平均数,其他检测板可记录为多不可计。结果计算式(3):

                        ∑C

                  NE = ——   •••••••••••••••••••3

                        nd

式中

NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值;

C——两个检测板上菌落数之和;

n——检测板的数量;

d——与样品悬液相一致的稀释倍数。

 

5、结果报告

固体样品以CFU/g为单位报告,液体样品以CFU/mL为单位报告。

 

6、附加说明

    注意使用过的检测板上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。

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