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水质粪大肠菌群检验纸片
水质粪大肠菌群检验纸片

产品编号:BD105Ⅰ、Ⅱ
产品规格:1份/包(15片)
保质期:冷藏 1年
产品用途: 适用于湖水、水源水中大肠菌群的快速检测。
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产品说明

 

BD105Ⅰ 水质(粪)大肠菌群快速检验纸片 1份/包 适用于湖水、水源水中大肠菌群的快速检测。

BD105Ⅱ 水质(粪)大肠菌群快速检验纸片 1份/包 适用于河水、生活用水、医疗机构处理后排污水、禽畜养殖业等排放废水中大肠菌群的快速检测。
 
分BD105Ⅰ和BD105Ⅱ两个型号,请注意选择型号。
 
1、适用范围 水质(粪)大肠菌群的测定 纸片快速法
 
本标准适用于地表水、生活污水、医疗机构及禽畜养殖业等其他行业排放的废水中(粪)大肠菌群的快速筛查。
本方法的检出限为20MPN/L。
 
2、规范性引用文件
本标准内容引用了下列文件或其中的条款。凡是不注明日期的引用文件,其有效版本适用于本标准。HJ/T91地表水和污水监测技术规范
 
3、术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
 
3.1总大肠菌群(total coliforms)
在37℃培养,24h内能发酵乳糖酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
 
3.2 粪大肠菌群(fecal coliforms)
44.5℃培养,24h内能发酵乳糖产酸气的总大肠菌群,属粪行来源,称为粪大肠菌群。
 
4、方法原理
将一定量的乳糖、指示剂(溴甲酚紫和2,3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及营养成分等吸附于一定面积的无菌滤纸上,当细菌生长繁殖时,产酸使PH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色。同时,产气过程相应的脱氢酶在适宜的PH范围内,催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有(粪)大肠菌群存在,再通过查MPN表就可得出相应(粪)大肠菌群的浓度值。
 
5、试剂和材料
除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。
 
5.1市售水质总大肠菌群、粪大肠菌群测试片:10ml水样量纸片按附录A的方法进行质量鉴定,达到要求后方可使用。
 
5.2无菌水
用新制备的去离子水或蒸馏水,按无菌操作要求,121℃高压蒸汽灭菌20min,备用。
 
5.3硫代硫酸钠溶液:ρ(Na2S2O3)=0.10g/ml
称取硫代硫酸钠10g,溶于适量蒸馏水(或去离子)中,稀释至100ml,现配。
 
5.4乙二胺四乙酸二钠(EDTA- Na2)溶液:ρ(C10H14N2O8Na2。 2H2O)=0.15g/ml
称取EDTA-Na2 15g,溶于适量蒸馏水(或去离子水)中,稀释至100ml,此溶液保质期为30d。
 
6、仪器和设备
6.1 恒温培养箱:37℃±1℃。
6.2 恒温培养箱:44℃±0.5℃。
6.3 高压蒸汽灭菌器:121℃、101.3kpa。
6.4 冰箱:0-4℃
6.5 移液管:1±0.01ml、10±0.1ml。
6.6 试管:φ15mm×150mm.
6.7 采样瓶:500ml。
注1:移液器、试管、采样瓶等玻璃器皿实验前要按无菌操作要求包扎,121℃高压蒸汽灭菌20min,烘干,备用。
 
 
7、样品
用灭菌器具,按照HJ/T 91的规定及无菌操作的要求,采集水样400ml放入已灭菌的采样瓶中。如果是经加氯处理的废水,需在采样瓶灭菌前加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA- Na2)溶液(5.4)1.2ml,以消除干扰。酸性样品,需调节胖胖的PH值至7.0-8.0。
采样后2h内检测,否则,需10℃以下冷藏并6h内送检,实验室接样后,应将样品放入0-4℃冰箱并2h内测定。
注2:10mg硫代硫酸钠可保证去除水样中1.5mg余氯,硫代硫酸钠用量克根据水样实际余氯量调整。
 
8、分析步骤
8.1接种量
每个样品按三个不同的接种量接种,每个接种量分别接种5张纸片,共接种15张纸片。
根据水样的污染程度确定接种量,应尽可能使5个接种量最大的纸片为阳性、5个接种量最小的纸片为阴性。
 
清洁水样的参考接种量分别为10 ml、1 ml、0.1 ml,受污染水样参考接种量根据污染程度可接种1 ml、0.1ml、0.01 ml或0.1 ml、0.01 ml、0.001 ml等。
 
接种量小于1ml时,水样应制成稀释样品后使用。接种量为0.1ml、0.01 ml时,分别制成1:10稀释样品、1:100稀释样品。其它接种量的稀释样品依次类推。
1:10稀释样品的制作方法为:吸取1ml水样,注入盛有9 ml无菌水的试管中,混匀,制成1:10稀释样品。其它稀释度的稀释样品同法制作。
 
8.2接种、培养
水样充分混匀,按无菌操作制作稀释水样及接种水样。
清洁水样,接种水样总量为55.5ml,10 ml水样量纸片5张,每张接种水样10ml,1 ml水样量纸片10张,其中5张各接种水样1ml,另5张各接种1:10的稀释水样1ml。受污染水样,接种3个不同稀释度的1ml稀释水样各5张。
接种水样应均匀涂布于纸片上,纸片充分侵润、吸收水样,用手轻轻压平,做好标记。
 
测总大肠菌群时,在37±1℃的条件下培养18-24h后观察结果;测粪大肠菌群时,在44.5±0.5℃的条件下培养18-24h后观察结果。
 
注3:
1、检测粪大肠菌群时,纸片接种后应立即放置于44.5±0.5℃的恒温培养箱中培养,在常温下放置过久将影响检测结果的准确性。
2、纸片加入水样后,短时间内变黄或退色,表明水样存在酸性物质活氧化剂干扰,需按“7样品”一节方法去除相应干扰。
 
9、结果判定
(1)纸片上出现红斑或红晕且周围变黄,为阳性。
(2)纸片全片变黄,无红斑或红晕,为阳性。
(3)纸片部分变黄,无红斑或红晕,为阴性。
(4)纸片的紫色背景上出现红斑或红晕,而周围不变黄,为阴性。
(5)纸片无变化,为阴性。

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